ИФА – иммуноферментный анализ крови: расшифровка

Сифилис – серьезное венерическое заболевание. Оно способно вызвать множество осложнений и поэтому требует определенного внимания и тщательно подобранной терапии. Лечение зависит от своевременной и полной диагностики заболевания.

Когда наиболее важен анализ  ПЦР на сифилис?

  1. При первичном сифилисе, когда анализы крови на сифилис еще не дают положительной реакции. В этом случае анализ ПЦР на бледную трепонему становится практически единственным методом диагностики.
  2. При обнаружении язвочек и эрозий у пациентов, переболевших сифилисом ранее и имеющих положительные реакции на сифилис пожизненно.

    Тогда положительная ПЦР  однозначно говорит о новом заражении.

  3. При затруднении постановки диагноза между сифилисом, герпесом, бактериальными и грибковыми язвами.
  4. Для установления диагноза нейросифилиса – обнаружение бледной трепонемы в спинномозговой жидкости.

Анализ ПЦР на бледную трепонему специальной подготовки не требует.

Желательно просто не обрабатывать антисептиками имеющиеся высыпания.

Врач клиники «Частная практика» дерматовенеролог, уролог Волохов Е.А. рассказывает об анализах на сифилис.

Пцр на сифилис (бледную трепонему) в наших клиниках ежедневно с до

В ЮАО и ЮЗАО – метро Варшавская, Каховская, Севастопольская – ул. Болотниковская дом 5 корп 2, тел. 8-499-317-29-72

Что такое ПЦР?

ПЦР высокочувствительная полимеразная цепная реакция, которая обнаружит возбудителя болезни (вирусы, бактерии, хламидии) в организме. Методика основана на определении специфической структуры ДНК, имеющейся у инфекции. ПЦР проводится при подозрении на скрытое хроническое течение инфекционного процесса в организме, пребывающего в латентной форме. К особенностям и достоинствам ПЦР относят:

  • высокую 100% чувствительность к возбудителям любого типа с наличием уникальных фрагментов нуклеиновых кислот,
  • быстроту получения результата,
  • возможность определения численности одного вида возбудителя,
  • одновременное диагностирование нескольких возбудителей.

Лаборанты без труда с помощью полимеразноцепной реакции определяют ДНК структуру  одиночного возбудителя, что дает возможность отслеживать и оценивать результаты лечения после назначения медикаментозной терапии. ПЦР, как новый метод исследования, незаменим для постановки диагноза при таких заболеваниях:

  • туберкулез,
  • дифтерия,
  • сальмонеллез,
  • ВИЧ,
  • СПИД,
  • гепатит С независимой стадии,
  • бактериоз.

Точность ПЦР как методики достигает 99% с выявлением возбудителей на начальном этапе поражения организма при отсутствии особой симптоматики у пациентов. Это гарантирует быстрое излечение от болезней, достижение устойчивой ремиссии в ряде случаев.

О ВИЧ

Возбудители заболевания бывают 1-ого и 2-ого типа. Продолжительный промежуток времени их присутствие у человека проходит незамеченным, дальше поражается в первую очередь иммунитет, затем другие системы человека.

При основном методе лабораторного диагностирования вируса иммунодефицита выявляются антитела к ВИЧ. Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе метода, он чувствителен (99,5% и выше) и специфичен (99,8% и выше). Кроме этого, при диагностировании ВИЧ с помощью ИФА определяют антиген р24.

Каждая тест-система имеет различные показатели, в связи с этим ими происходит определение различных белковых структур вирусных оболочек. Возбудители ВИЧ бывают двух подтипов: 1-ого и 2-ого или ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Вирусные частицы выглядят как сферическая форма, имеющая наружную фосфолипидную оболочку. Для 1-ого подтипа она имеет следующую молекулярную массу: gp120, gp41, gp160. 2-ой подтип содержит gp105, gp36, gp140. Для внутренней оболочки вируса молекулярная масса так же известна. Для 1-ого подтипа это — p55, p17, p24. Для 2-ого — p16, p25, p55.

Для каждой тест-системы, чтобы определить вирус, существует три основных набора белков.

Вообще результат ИФА может быть:

  • отрицательный;
  • ложноположительный;
  • ложноотрицательный;
  • сомнительный или неопределенный.

Методами диагностирования выявляются антигены, антитела.

Виды диагностики сифилиса

Диагностировать сифилис можно путем обнаружения самого возбудителя (бледной трепонемы) и антител к трепонеме, циркулирующих в крови. Существует множество методик поиска антител, которые называются серологической диагностикой.

Обнаружение возбудителя — самый надежный способ установить диагноз, но не всегда возможно определить его местонахождение и забрать материал для исследования, поэтому серодиагностика получила более широкое распространение.

Рекомендуем МАР (MAR) тест для мужчин: что это, расшифровка результата анализа, норма

1.1 Реакция Вассермана

Самым первым методом диагностики является реакция Вассермана. В клинической практике можно встретить условные обозначения — RW, РСК. Эту пробу проводят всем при регулярных профосмотрах и тем, кто обратился к дерматовенерологу по поводу другого заболевания, передающегося половым путем.

Методика теста заключается в добавлении к сыворотке пациента, в которой могут быть антитела к трепонеме, антигена — кардиолипина. В этой же смеси должны присутствовать эритроциты барана и гемолитические вещества (система комплемента).

Если антител в крови больного нет, комплемент прореагирует с эритроцитами барана и приведет к их разрушению — гемолизу. Если антитела есть, они соединятся с антигенами и комплементом, а неразрушенные эритроциты выпадут в осадок.

Реакция простая и быстрая, но ее главный минус — низкая специфичность. То есть положительный результат не всегда указывает на заболевание сифилисом.

Рекомендуем Как исследуют секрет простаты: взятие материала и расшифровка анализа

1.2 Микрореакция преципитации

Еще один метод неспецифической диагностики сифилиса — микрореакция преципитации (МР). Ее принцип сходен с реакцией Вассермана. Считается более специфичной за счет дополнительных реагентов.

Смешивают сыворотку пациента и неспецифические антигены, но в данном случае процесс происходит на стекле, а антигены помечены угольной пылью, поэтому при связывании их антителами на стекле образуются черные скопления, которые можно наблюдать с помощью микроскопа.

Рекомендуем Посев на уреаплазму у мужчин: суть метода, подготовка к исследованию и расшифровка анализа

1.3 Специфические серологические тесты

Для уточнения диагноза применяется целый ряд специфических серологических тестов, каждый из которых имеет свои особенности выполнения, показания для проведения и преимущества:

Название Сокращенное обозначение Суть метода
Иммуноферментный анализ ИФА Суть метода заключается в смешивании сыворотки больного и антигенов на пластиковом планшете. Если в крови были антитела, они соединятся с антигенами. Следующий этап — смывание лишних антигенов и антител, на планшете остаются только связанные комплексы. Затем к ним добавляют вещества, содержащие ферменты, и субстрат для этих ферментов. При соединении их с комплексами «антиген-антитело» запускается ферментативная реакция, врач наблюдает изменение цвета на планшете
Реакция иммунофлюоресценции РИФ Реакция иммунофлюоресценции мало отличается от ИФА. При ней также происходит соединение антигена с антителами, но антигены помечены флюоресцентной краской, поэтому при образовании комплексов можно обнаружить свечение
Реакция пассивной гемагглютинации РПГА Строится на связывании антигена и антитела. В данном случае антигены закреплены на эритроцитах барана, при добавлении антител в сыворотке больного запускается гемолитическая реакция — врач наблюдает разрушение эритроцитов
Реакция иммобилизации бледных трепонем РИБТ Данный метод относится к трепонемным тестам — то есть демонстрирует прямое влияние антител крови на возбудителя. Врач помещает на стекло бледных трепонем из лаборатории, добавляет сыворотку больного. Если в ней есть антитела к трепонемам, они затормозят и остановят движение спирохет

Исследование сыворотки крови на сифилис имеет смысл проводить не раньше, чем через 10 дней после появления язвы в месте проникновения бактерии в организм — твердого шанкра.

Доступными и простыми в исполнении являются ИФА и РПГА, которые получили свое распространение в клинической практике.

Технические характеристики

Состав набора: 1. Планшет полистироловый 96-луночный разборный — 2 шт., 2. Конъюгат — прозрачная желтая жидкость, 3. Контроль положительный — прозрачная красная жидкость, 4. Контроль отрицательный — прозрачная зеленая жидкость, 5. Промывочный раствор, концентрат, рН от 6,9 до 7,6, 6. ТМБ — прозрачная бесцветная жидкость, 7. Раствор субстрата — прозрачная бесцветная жидкость, pH ~4,2. 8. Стоп-реагент (0,2М), 9. Инструкция по применению и паспорт качества. Условия хранения: при температуре +2…8°C, замораживание недопустимо. Срок годности — 15 месяцев с даты производства, указанной на этикетке набора. Соответствие требованиям ТУ 9398-182-05941003-2010. Зарегистрировано в Росздравнадзор.

Расшифровка анализа

Чтобы понять, как расшифровывают результаты анализа, необходимо понимать, что обозначают те или иные показатели:

  • lgМ — значение показывает то, как долго организм заражён инфекцией;
  • lgА —  показатель говорит о продолжительности заболевания сроком более, чем четыре недели;
  • lgG — фактор свидетельствует о достижении пика болезни.

Окрашивание реактива в желтый цвет свидетельствует о том, что возбудитель присутствует в организме.

Для расшифровки результатов анализа используется специализированное оборудование. Оно определяет плотность взятого материала в сравнении с контрольной пробой. Таким образом, устанавливается итог для любого вида возбудителя заболевания.

Диагностика

Лабораторная диагностика сегодня является основной методикой выявления этого недуга. Наиболее достоверный результат получают при исследовании крови. При этом применяют современные методики. Многие люди интересуются, какие анализы крови сдают на сифилис. Ранее этот тип диагностики назывался реакцией Вассермана (RW). Сегодня подобное исследование имеет несколько названия:

  • неспецифический антифосфолипидный тест;
  • PRP-тест;
  • нетрепонемный антикардиолипиновый тест;
  • реагиновый тест.
  • Диагностика

    Эти анализы позволяют обнаружить в крови человека специфические и неспецифические антитела таких категорий, как IgG, IgM. Если проводится анализ на специфические антитела, тест показывает подобных клеток, которые вырабатываются как реакция на бактерии. Этот анализ называется трепонемным тестом. Этот анализ стоит дороже.

    Второй вариант тестов выявляется неспецифические антитела. Они высвобождаются при разрушении клеток трепонемы.

    Оба эти подхода применяют для выявления заболевания на ранних стадиях и для наблюдения за состоянием пациента в динамике в ходе лечения. Однако между этими методиками есть значительное отличие. Если после сифилиса сдавать кровь для обследования по трепонемной методике, тест покажет у пролеченного пациента через некоторое время после выздоровления положительный результат. А при нетрпонемном тесте ответ будет у такого человека отрицательным.

    Сдать кровь на ВИЧ (сифилис) можно и по другим методикам. Это может быть широко известная реакция Вассермана, метод полимеризации цепной реакции (ПЦР), реакция иммунофлюоресценции (РИФ) и т. д. Существует множество подходов к определению наличия представленной бактерии в организме.

    Анализ спинно-мозговой жидкости

    В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

    Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

    Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

    Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

    Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

    Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

    Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

    По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

    Анализы на сифилис: как называются, как сдавать, какой самый достоверный? — всё о заболеваниях половой сферы, их диагностике, операциях, проблемах бесплодия и беременности на

    Женский организм по праву можно назвать ещё одним чудом света. Это источник человеческой жизни, её носитель, а разве есть на Земле более высшая ценность? Поэтому так важно женщинам заботиться о своём здоровье, и прежде всего — о репродуктивной системе. Если она даст сбой, не будет ни полноценного зачатия ребёнка, ни спокойной беременности, ни благополучного родоразрешения. Чтобы генофонд нашей планеты улучшался, нужна гинекология — древнейшая отрасль медицины, которая изучает и лечит заболевания, характерные исключительно для женского организма.

    Слово «гинекология» образовано от двух греческих слов: «γυναίκα», что значит «женщина» И «λόγος», что переводится как «изучение»

    К сожалению, не все регулярно и своевременно посещают «женского врача», даже если возникли какие-то проблемы. У одних нет времени, другие просто стесняются. Результат — серьёзные нарушения в работе половой системы, которые негативно сказываются на репродуктивной функции женского организма. Чем больше вы будете знать о том, что происходит с вашим организмом, тем спокойнее вы будете относиться к происходящим внутри вас процессам. Благодаря статьям, которые вы найдёте на сайте, вы сможете:

    • по некоторым симптомам и признакам распознавать различные заболевания, касающиеся гинекологии, и вовремя обращаться за помощью к врачам;
    • понимать терминологию, которую используют гинекологи, и не бояться этих страшных на первый взгляд слов;
    • знать, как правильно подготовиться к тем или иным анализам, чтобы результаты были более достоверными;
    • уметь читать результаты своих анализов.

    А самое главное, чему научит этот проект всех женщин — не бояться своевременно и регулярно ходить к гинекологам. Это позволит забыть о проблемах, быть всегда жизнерадостной и красивой. Ведь женская молодость на 90% зависит от здоровья репродуктивной системы. Сайт готов помочь предоставить самую полезную информацию на эту тему:

    • об анализах и диагностике;
    • о различных женских заболеваниях;
    • о зачатии и вынашивании ребёнка;
    • о родах;
    • о лекарственных препаратах.

    Хотите быть молодой и красивой? В таком случае позаботьтесь о своём женском здоровье прямо сейчас. Здесь вы найдёте всю интересующую вас информацию — подробную, достоверную и доступную вашему пониманию. Не относитесь легкомысленно к тому, от чего зависит жизнь всего человечества, ведь каждая из вас прежде всего — Мать.

    Понравилась статья? Поделитесь ссылкой! Спасибо ツ

    Какое количество антител считать достаточным

    Ответ здесь очень простой – lgG больше референсного значения свидетельствует о перенесенном заболевании и наличии иммунитета к коронавирусной инфекции. Это значение при Sars-CoV-2 составляет 10.0.

    На сегодняшний день используется несколько методов тестирования для определения антител в крови – это, в первую очередь, экспресс-исследования и иммуноферментный анализ ИФА. Быстрые тесты можно сравнить с домашними тест-полосками на выявление беременности

    Присутствие в крови антител типа G означает, что иммунные клетки распознали вирус, и запущен процесс реагирования. Цифровой параметр показывает, насколько выражен иммунный ответ. Референсные значения получают путем массового тестирования здорового населения.

    В подавляющем большинстве российских тест-систем, использующих методику ИФА и ИХЛА – иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа – референсные значения lgG составляют Но есть и такие, где они равны 2.5.

    Внимание! При сдаче теста лучше уточнить, каково референтное значение, чтобы не ошибиться в расшифровке.

    Какое количество антител считать достаточным

    Таким образом, количество антител считается хорошим, если оно выше или равно референтным показателям.

    Интерпретация количественных тестов lgG:

    Содержание, ОЕ/мл 0-12 12-15 ≥15
    Результат Отрицательно Сомнительно Положительно
    Расшифровка Антител нет или их уровень ниже определимого. Такой результат может быть у больного человека, когда вирус находится в периоде инкубации, или идет ранняя стадия болезни Низкий уровень антител, рекомендован повторный анализ через 1-2 недели Высокая концентрация защитных антител

    Максимальное значение уровня антител типа G – это показатель высокой стойкости иммунитета. Если он больше 15, можно говорить о некоторой защищенности от повторного заражения. Однако связь между данными параметрами достоверно еще не установлена, и как долго продлится эта защита, сказать нельзя.

    При lgG больше 100 можно даже стать донором плазмы и отдать свою кровь тяжелобольным ковидным пациентам. В некоторых лабораториях этот порог еще ниже и составляет lgG=40.

    Подготовка к анализу и ход процедуры

    Подготовка к анализу включает следующие пункты:

    • воздержание от сексуальных контактов;
    • исключение приема алкоголя и курения накануне забора крови;
    • ограничение жирной и соленой пищи за день до исследования.

    Кровь берут с утра натощак. Забор биологического материала производится посредством венепункции. Объем изъятой крови составляет около 5 мл.

    Таким образом, проверяться на ВИЧ или нет – дело сугубо индивидуальное. Однако нужно учитывать, что многие люди, живущие с вирусом иммунодефицита человека, долгое время не отмечают никаких симптомов и не знают о своей болезни. Поэтому если имели место потенциально опасные ситуации, следует пересилить страх и пройти обследование.

    Читайте также:  Венерические болезни тропических стран: лимфогранулематоз и донованоз